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移液器基本结构
移液器在临床实验室中因为基本结构简单，使用方便等原因而得到广泛应用。其基本结构主要有显示窗、容量调节部件、活塞、0-形环、吸引管和吸头(吸液嘴)等几个部分[1] 。
移液器工作原理
临床常用的微量移液器的设计依据是胡克定律：即在一定限度内弹簧伸展的长力与弹力成正比，也就是移液器内的液体体积与移液器内的弹簧弹力成正比。
微量移液器加样的物理学原理有两种：使用空气垫加样和使用无空气垫的活塞正移动(positivedisplacement)加样。这两种不同原理的微量移液器有其不同的特定应用范围[1] 。
移液器常见分类
- 根据工作原理可分为空气置换移液器与正向置换移液器；
- 根据能够同时安装吸头的数量可将其分为单通道移液器和多通道移液器；
- 根据刻度是否可调节可将其分为固定移液器和可调节式移液器；
- 根据调节刻度方式可将其分为手动式移液器和电动式移液器；
- 根据特殊用途可将其分为全消毒移液器、大容量移液器、瓶口移液器、连续注射移液器等[1] 。
移液器临床应用
临床诊断实验室，生物技术实验室， 药学和化学实验室，环境实验室，食品实验室
移液器使用方法
1.选择合适的移液器
移取标准溶液(如水、缓冲液、稀释的盐溶液和酸碱溶液)时多使用空气置换移液器，移取具有高挥发性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液体或者在临床聚合酶链反应(PCR)测定中的加样时使用正向置换移液器。如移取15ul的液体，选择量程为20ul的移液器，选择50ul及其以上量程的移液器都不够准确。
2.设定移液体积
调节移液器的移液体积控制旋钮进行移液量的设定。调节移液量时，应视体积大小而旋转刻度至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，以保证移取的精确度。
3.装配吸头
使用单通道移液器时，将可调式移液器的嘴锥对准吸头管口，轻轻用力垂直下压使之装紧。使用多通道移液器时，将移液器的排对准个管嘴，倾斜插入，前后稍微摇动拧紧。
4.移液
保证移液器、吸头和待移取液体处于同一温度；然后用待移取吸液体润洗吸头1-2次，尤其是黏稠的液体或密度与水不同的液体。移取液体时，将吸头垂直浸入液面以下2-3mm深度(严禁将吸头全部插入溶液中),缓慢均匀地松开操作杆，待吸头吸入溶液后静置2-3秒，并斜贴在容器壁上淌走吸头外壁多余的液体。
5. 移液器的放置
使用移液器完毕后，用大拇指按住吸头推杆向下压，安全退出吸头后将其容量调到标识的值，然后将移液器悬挂在专用的移液器架上；长期不用时应置于专用盒内[1] 。
移液器移取方法
- 前进移液法按下移液操作杆至停点位置，然后缓慢松开按钮回原点；接着将移液操作杆按至停点位置排出液体，稍停片刻继续将移液操作杆按至二停点位置排出残余液体，最后缓慢松开移液操作杆。
- 反向移液法先按下按钮至第二停点位置，慢慢松开移液操作杆回原点，排出液体时将移液操作杆按至停点位置排出设置好体积的液体，继续保持按住移液操作杆位于停点位置取下有残留液体的吸头而弃之。
移液器注意事项
- 在调节移液器的过程中，转动旋钮不可太快，也不能超出其或最小量程，否则易导致量不准确，并且易卡住内部机械装置而损坏移液器。
- 在装配吸头的过程中，用移液器反复强烈撞击吸头反而会拧不紧，长期如此操作，会导致移液器中零件松散，严重时会导致调节刻度的旋钮卡住。
- 当移液器吸头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流而腐蚀活塞弹簧。
- 对移液器进行高温消毒时，应首先查阅所使用的移液器是否适合高温消毒后在进行处理。
移液器维护保养
移液器应根据使用频率进行定期维护，但至少每隔3个月维护一次，检查移液器是否有灰尘和污物，尤其注意其嘴锥部位。长期维护时需要清洁移液器内部，必须由经培训合格的人员拆卸[1] 。
1.移液器的清洁
内部的清洁需要先拆卸移液器下半部分，拆卸下来的部件用肥皂水、洗洁精或60%异丙醇来擦洗，再用双蒸水冲洗，晾干，再在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的起润滑作用的硅树脂；密封圈一般无需清洗。
2.移液器的消毒
可采用常规高温高压灭菌处理或紫外线照射灭菌进行消毒。
3.移液器上污染核酸的去除
将移液器下半部分拆卸下来的内、外套筒，在95℃清洗液中浸泡30分钟，再用双蒸水将套筒冲洗干净，60℃下烘干或晾干，最后在活塞表面涂上润滑剂(硅树脂)并将部件组装。
移液器选择标准
- 性能：准确性和重复性
- 耐用性/维护：移液器使用寿命长，仅需要很少的维护或维护成本低
- 符合人体工程学原理： 手感舒适，吸排液操作力轻，避免重复性肌劳损，退吸头力小
- 选择具有厂商资质售后服务的品牌。
移液器常见移液器
移液器微量移液器
微量移液器是生物\化学实验室常用的小容量移取液体的单道微量移液器。
移液器外置活塞移液器
由于蒸汽压,密度,黏度不同,在吸取一些高黏度的物质时,如油脂,蛋白等,无法吸取。外置活塞移液器却能胜任。
外置活塞移液器
具有与单道空气活塞式移液器一样准确的精度和误差系数。可以适用于高黏度液体，如蛋白，树脂，黏度可达50,000mm2/s，密度可达13.6g/cm3 ,如汞等；高蒸汽压的液体，蒸汽压可达500mbar，无论酒精还是一些碳氢化合物，都能轻松移取。发泡性液体的移取也毫无问题。
移液器瓶口移液器
根据型号不同,通常用于中等流量(0.5ml-100ml)的液体的运输,如酸,碱等,根据吸取的液体的性质不同分为Dispensette III, Dispensette Organic 和Dispensette HF 。可以整体于121℃中消毒。
移液器手动连续移液器
可以迅速而方便地完成连续移液工作,可以轻松完成2ul-5000ul的试剂。一次吸液完成49次之多。对于粘稠，高密度液体和高蒸汽压液体同样可以准确移取。适用 于Plastibrａnd PD吸头，Combitips吸头以及其他活塞式吸头。
移液器电子连续移液器
利用微处理器控制操作可达到自动识别特定的PD-吸头
移液体积控制范围从1ul-50ml，移动7.01ul，70.1ul等将毫无问题。
自动分配，电子连续移液器可根据连续三次移液的平均间隔时间，然后进行分液。(所需时间可自动计算，不需人工计算和输入)。
智能充电，可直接将电子连续移液器插入充电器进行充电，也可将电池取下进行充电。更换备用电池时，原储存数据不会因短电而丢失。
移液器电子滴定器
常用于食品，制药，石油化工等行业。
体积小，电池寿命长，适合于狭小空间和远离电源的地方使用。操作简便，吸入试剂时，按“Fill”键，手轮向上旋动，如开始滴定，按“Titr”键开始，手轮向下旋动，即开始显示滴定体积。数字显示，减少了人为读数和计算体积时所带来的误差。无需工具，用户可自行校准。
移液器移液器校准
清洁后的移液器需要校准。移液器校准时必须在室温条件(25+/-2℃)下进行。参照移液器的使用说明，不同刻度10000\5000\1000\200ul必须分别进行校准。
- 将移液头里的气泡排除，选择好需要校准的刻度。
- 将一空容器放在精度为0.1 毫克的电子天平上去皮。
- 按加液键，将水加入空容器中称重，记录读数。
- 按照国标，移液器的校准采用“三点测试（量程的99%，50%和10%），每点六次”的规则，而供应商通常会选择两种规则：一是简易校准，也就是两点测试（量程的99%和10%），每点四次；二是严格校准，也就是三点测试（量程的99%，50%和10%），每点十次。使用者根据自己的实际需求选择一种规则完成测试后即进入计算环节。（根据平均值与实际值间的差值进行调节，用工具来拧弹簧卡扣的松紧）
移液器检修常识
常见问题[2] | 原因 | 解决方法 |
移液器渗漏 | ●使用了不合适的吸头 | ●用原厂的吸头 |
●吸头安装不正确 | ●稳妥安装吸头 | |
●吸头圆锥磨损货污染 | ●清洗安全圆锥 ●更换安全圆锥 | |
●活塞密封磨损或润滑剂不足 | ●清洗并给垫圈重上润滑剂 ●更换垫圈 | |
●仪器损坏 | ●送去维修 | |
移液性能规格超出给定范围 | ●使用了不合适的吸头 | ●用原厂的吸头测试 |
●非标准测试条件或校准改变 | ●根据ISO 8655标准进行测试，必要时再校正 | |
●移液器没有定期保养 | ●进行常规维护并在测试 | |
●安全圆锥过滤器污染 | ●更换安全圆锥过滤器 | |
●移液器渗漏 | ●见一下说明 | |
操作按钮卡住或无法固定 | ●液体已经通过吸头圆锥并在移液器内部变干 | ●清洗活塞/密封处和吸头圆锥并上油 |
●安全圆锥过滤器污染 | ●更换安全圆锥过滤器 | |
●润滑剂不足 | ●相应上润滑剂 | |
移液器阻塞，洗液容量太小 | ●液体已经通过吸头圆锥并在移液器内部变干 | ●清洗并给垫圈和活塞重上润滑剂，清洗安全圆锥 |
吸头弹出器卡住或无法固定 | ●吸头圆锥和/或止推环污染 | ●用软布和柔和的清洁剂或70%乙醇擦干净 |
参考资料
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