线粒体呼吸链复合体Ⅳ/氧化酶测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/96样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
线粒体复合体Ⅳ又称氧化酶,也是线粒体呼吸电子传递链主路和支路的共有成分,负责催化还原型的氧化,并终把电子传递给氧,生成水。
测定原理:
还原型在550nm有特征光吸收,线粒体复合体Ⅳ催化还原型生成氧化型,因此550nm光吸收下降速率能够反映线粒体复合体Ⅳ酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
测定步骤:测定步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至550nm,蒸馏水调零。
2、样本测定
(1)工作液的配制:临用前将试剂五和试剂六依次转移到试剂四中混合溶解,置于37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)孵育5min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入20μL样本和200μL工作液,混匀,记录550nm处初始吸光值A1和 37℃反应30min后的吸光值A2,计算ΔA=A1-A2。
(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本、25μL试剂六和200μL工作液,立即混匀,记录550nm处初始吸光值A1和 2min后的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1。
所有评论仅代表网友意见，与本站立场无关。