液相色谱仪是实验室常规的分析仪器，它是由高压液体泵，检测器和
液相色谱柱组成的。其中液相色谱柱是液相色谱仪的核心，如何正确的安装液相色谱柱也是液相色谱工作人员必须学习的******。因为只有正确的安装和使用液相色谱柱才能够让使用者获得******的数据。
一、
液相色谱柱的安装：
液相色谱柱组成部分是由空柱，接头，柱管等部分组成，两边是螺纹组件。一端外螺纹是7到16英寸，另外一端内螺纹是3到16英寸，外螺纹与4分子1的柱管相互链接。中间用压环用来密封，内螺纹与16/1之一的柱管链接。中间同样也是用压环进行密封，为了减少液相色谱柱的柱管死体积，在操作安装的过程中。在使用1.57MM的连接管通过空心螺钉压环之后一定要插到底，然后拧紧螺纹。压环被螺纹压变形之后紧箍在链接管上。
在柱子的两端分别放置一片过滤网，或者不锈钢滤片。用来堵塞填料不被流动相流出柱管外而流失，柱管部件都为不锈钢材质，能耐受一定的溶剂作用，但是由于有的溶剂含有一定的腐蚀性，所以使用需要注意，柱子管内不能长时间停留这类的溶剂，避免腐蚀。
填料:
液相色谱柱的分离是在填料和流动相之间来进行的。柱子的选择是根据填料的类型来选择的。
正相柱多是以硅胶为填料。依照形状可以分为无定型和球形2种形状，
反相柱主要是以硅胶填料。同样的也有球形和无定型2钟状态。
μm的范围内。另一类正相填料是硅胶表面键合—CN，-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。
反相柱：主要是以硅胶为基质，在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的非极性填料。也有无定型和球型之分。
常用的其他的反相填料还有键合C8、C4、C2、苯基等，其颗粒粒径在3—10 μm之间。
二、
液相色谱柱的使用：
色谱柱在使用前，******进行柱的性能测试，并将结果保存起来，作为今后评价柱性能变化的参考。但要注意：柱性能可能由于所使用的样品、流动相、柱温等条件的差异而有所不同;另外，在做柱性能测试时是按照色谱柱出厂报告中的条件进行(出厂测试所使用的条件是******条件)，只有这样，测得的结果才有可比性。
1、样品的前处理：
a、******使用流动相溶解样品。
b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
c、使用0.45μm的过滤膜过滤除去微粒杂质。
2、流动相的配制：
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的，因此要求流动相具备以下的特点：
a、流动相对样品具有一定的溶解能力，******样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。
b、流动相具有一定惰性，与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。
c、流动相的黏度要尽量小，以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降，延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。
d、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器，******使用对紫外吸收较低的溶剂配制。e、流动相沸点不要太低，否则容易产生气泡，导致实验无法进行。
f、在流动相配制好后，一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测，还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。
3、流动相流速的选择：
因柱效是柱中流动相线性流速的函数，使用不同的流速可得到不同的柱效。对于一根特定的色谱柱，要追求******柱效，******使用******流速。对内径为4.6mm的色谱柱，流速一般选择1ml/min，对于内径为4.0mm柱，流速0.8ml/min为佳。
当选用******流速时，分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时，可适当增加甲醇或乙腈的含量)。
注意：
a.由于甲醇廉价，对于反相柱推荐使用甲醇体系(必须使用乙腈的场合除外)。
b.对于正相柱推荐使用沸程为30-60℃的石油醚或提纯后的己烷作流动相，没有提纯的己烷不得使用。用水******使用超纯水(电阻率大于18兆欧)，去离子水及双蒸水中含有酚类杂质，有可能影响分析结果。
c.含水流动相***在实验前配制，尤其是夏天使用缓冲溶液作为流动相不要隔夜。******加入，防止细菌生长。
d.流动相要求使用0.45 μm滤膜过滤，除去微粒杂质。
e.使用HPLC级溶剂配制流动相，使用合适的流动相可延长色谱柱的使用寿命，提高色谱柱性能。
4、色谱柱性能测试：
启动
液相色谱仪：a、流动相流速设定为1ml/min。
b、UV检测器波长设定为254nm。
使用出厂测试时使用的流动相组成及测试样品。
记录并计算测试结果。
