紫外分光光度计的原理：

    物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量，相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空间结构，其吸收光能量的情况也就不会相同，因此，每种物质就有其的、固定的吸收光谱曲线，可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量，这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸 收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

    紫外分光光度法的定量分析基础是朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律。即物质在一定浓度的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比，其数学表示式如下：

     A=錬c

    式中：A—吸光度(又称光密度、消光值)，

    å—摩尔吸光系数(其物理意义为：当吸光物质浓度为1摩尔/升，吸收池厚为1厘米，以一定波长原光通过时，所 引起的吸光值A)，b—吸收介质的厚度(厘米)，c—吸光物质的 浓度(摩尔/升)。

    物质的颜色和它的电子结构有密切的关系，当辐射(光子)引起电子跃迁使分子(或离子)从基 态上升到激发态时，分子(或离子)就会在可见区或紫外呈现吸光，颜色的发生或变化是和分 子的正常电子结构的变形的。当分子中含有一个或更多的生色基因(即具有不饱和键的 原子基团)，辐射就会引起分子中电子能量的改变。常见的生色团有：

    CO， -N=N-， -N=O，-C N，CS

    如果两个生色团之间隔一个碳原子，则形成共轭基团，会使吸收带移向较长的波长处(即红 移)，且吸收带的强度显著增加。当分子中含有助色基团(有未共用电子对的基团)时，也会 产生红移效应。常见的助色基团有：-OH -NH2， -SH， -Cl, -Br, -I