自动DNA合成仪的操作要点

        1. 合成开始后的检查点
        合成开始时，检查第二个核苷酸 de-DMT 产生的橙色，以确保一切正常。 * DMT 的颜色不能用作提供信息的基础，因为它是 * 装载到载体中的核苷的量度。检查合成柱是否泄漏。泄漏的原因可能是色谱柱错误或色谱柱上的鲁尔接头和合成器没有拧紧。检查监视器上的详细信息并在必要时恢复所需的参数。
         2、试剂在DNA自动合成仪上的稳定性
        无论合成程度如何，试剂管道中的单体都需要每隔几分钟补充一次，不会出现严重的亚磷酰胺分解。但如果仪器运行时间不超过1小时，合成前必须清洗试剂管道，去除管内分解的试剂。即使在这种条件下，试剂的寿命也是有限的。因此，在合成仪上存放超过 2 周的试剂应丢弃；合成30碱基12 1-_寡核苷酸时，施磷酰胺和四唑在合成仪上的时间应小于1周。合成50mer或更长的寡核苷酸，应使用新鲜的亚磷酰胺、四唑和乙腈。
         3. 自动DNA合成仪上的试剂更换
        在合成过程中使用任何一种试剂都会导致合成失败。因此，您必须在合成前检查所有容器中的试剂量。如果实验室的温度低于18~C，则需要使用吹风机加热储液器以溶解一些晶体。如果某个位置配备了一次性塞子，请在将新瓶子放在合成器上时检查并更换塞子。不应使用任何破裂的软木塞，还应检查安全的软木塞。另外，检查试剂瓶边缘是否有缝隙。缺口瓶未在合成仪上塞紧，试剂无法运输。
         4. 合成时更换试剂瓶。
        在特定循环中单体缩合、密封、氧化完成后，等待乙腈清洗，中断循环和三列。然后按正常方法换瓶，取消所有中断信息，重新开始合成。不要让合成中断超过 1 分钟。这会降低耦合率或导致合成失败。