药学本科开题报告 大孔吸附树脂分离纯化蜂胶总黄酮的研究 院 (部) 系：药学院 所学专业：药学 年级班级：2008级药学本科一班 目录 选题依据 国内外研究现状 研究方案 进程计划 参考文献 选题依据 选题目的研究大孔吸附树脂分离纯化蜂胶总黄酮的工艺条件 选题意义本实验采用大孔吸附树脂对蜂胶总黄酮的分离纯化工艺进行了研究，旨在为新药的研制开发中利用该技术制备蜂胶总黄酮提供帮助。 国内外研究现状 大孔吸附树脂是一类有机高聚物吸附剂, 近年来广泛应用于天然产物的分离。根据其孔径、比表面及构成类型分为许多类型。 蜂胶是蜜蜂从植物芽孢或树干采集的蜂蜜，混入蜜蜂上颌腺分泌物和蜂蜡后加工制成的芳香味的胶状固体物质，现作为一种保健品被广泛应用。 蜂胶中含有丰富的黄酮类物质。近年来,随着对蜂胶药理作用的深入研究,表明蜂胶中的黄酮类化合物具有抗衰老 、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用。尚未见采用大孔吸附树脂分离纯化蜂胶总黄酮的系统报道,故本试验对D101 型(非极性) 、FL-1型、FL-2型和AB - 8 型4 种大孔吸附树脂进行筛选, 并对蜂胶总黄酮分离纯化工艺进行研究。 研究方案 研究方法 1.1上样溶液的制备 70%乙醇与蜂胶液固比为15：1，60 下超声25分钟，超声完后离心，取上清液，在40-50 条件下蒸去乙醇，加适量蒸馏水溶解，收集母液，作为上样液。

1.2上样液浓度的测定 1.2.1标准品溶液的配制取上样液3ml加入7ml无水乙醇，再加入0.1ml10%三氯化铝，显色15分钟。 1.2.2 对照品溶液的配制 取70%乙醇10ml，加入0.1ml10%三氯化铝，显色15分钟。1.2.3 测定吸光度 由于标准曲线已绘制好，本实验可直接使用。利用紫外分光光度计测定其吸光度，浓度。 1.3树脂的预处理及含水量的测定 取 4 种大孔树脂适量，分别用乙醇浸泡24 h，充分溶胀，用95%乙醇冲洗，至洗出液按1∶5 加蒸馏水无白色浑浊现象，再用蒸馏水洗至无醇味，处理后的树脂密封保存，备用。取少量树脂，抽干，后，测定各树脂的含水量。 1.4藤茶总黄酮的静态吸附性能的考察 1.4.1树脂比吸附量的测定 精密称取上述处理好的4 种吸附树脂（每份相当于干树脂4 g）置500mL 锥形瓶中，分别加入350 mL 上样液，室温振摇吸附，于1、2、4、6、8、10 h 吸取上清液测定吸光度，计算在各时刻树脂对藤茶总黄酮的比吸附量并比较 1.4.2藤茶总黄酮的静态解吸附性能的考察 将 4种吸附饱和的树脂滤出，水洗，滤纸吸干，每种树脂等分成4 份，每份相当于各干树脂1.0 g，各精密加入30%、50%、70%、90%乙醇40 mL，振摇6 h，静置24 h，收集每份乙醇洗脱液，依法测定吸光度，测定其总黄酮的量。

计算其解吸率和回收率。经比较得出树脂和洗脱剂。 1.5大孔吸附树脂动态吸附条件的考察 1.5.1原液质量浓度对吸附的影响 取 5 根已处理好的树脂柱5.85g，精密量取5 份上样液10 ml分别加入蒸馏水0、5、10、15、20 mL，混匀后上柱，体积流量为1 mL/min，分别收集过柱液，测定质量浓度，计算吸附量，并进行比较。 1.5.2吸附流量对吸附的影响 取3 根已处理好的 树脂柱，用16 mL 1.5.1得到的总黄酮质量浓度的上样液上样。吸附流量分别为1、2、3 mL/min ，3 根树脂柱分别用蒸馏水洗脱至洗脱液无色。测定吸光度，计算得树脂动态吸附，记录所用蒸馏水体积。 1.5.3吸附时间的考察 取4 根已处理好的 树脂柱，按1.5.2的方法上样分别静置0、1h、2h、4h ，4 根树脂柱分别用等量蒸馏水洗脱至洗脱液无色。过柱液定容，测定吸光度，计算得树脂动态吸附量。 1.6大孔树脂动态解吸附条件的考察 1.6.1洗脱剂的考察 取 4 根达到吸附饱和的 树脂柱，分别用蒸馏水洗脱至洗脱液近无色，再分别用30%、50%、70%、90%乙醇以1ml/min洗脱，洗脱至无色。

收集乙醇洗脱液，测定其总黄酮的量。 1.6.2洗脱剂流量的考察 取 3 根达到吸附饱和的树脂柱，分别用蒸馏水洗脱至洗脱液近无色，再用1.6.1所得的洗脱的乙醇分别以1、2、3 mL/min 洗脱，洗脱至无色。收集乙醇洗脱液，测定其总黄酮的量 实验材料 仪器：干燥箱（X），离心机（X），紫外分光光度仪（X），电子天平（X）,超声清洗器，真空泵,摇床。 试药：蜂胶，无水乙醇（分析纯），三氯化铝，蒸馏水。 参考文献 [1]Li JM，Jin ZX，Chen T， Da Xue Xue Bao Yi Xue Ban[J].2006 May;35(3):273-80. [2]Guo JP，Pang J，Wang XW，Shen ZQ, World J [J]。2006 Jul 7;12(25):4078-81. [3]Xiao Y，Liu T，Huang Z，Hua Xi Yi Ke Da Xue Xue Bao[J]. 2002 Apr;33(2):253-5. Chinese. [4]全国中药汇编编写组. 中药汇编 [M]. 下册. 北京: 人民卫生出版社, 1997