比色法和吸光光度法

比色法和吸光光度法

人眼可看到可见光的波长范围为400nm～750nm，按波长从长到短排列，依次为红、橙、黄、绿、青、蓝、紫。其中红光的波长范围为650nm～750nm；紫光的波长范围为400nm～450nm。

物质呈现的颜色与光有着密切的关系。物质所以呈现不同的颜色是由于该物质对光具有选择性吸收的原故。

当一束白光(混合光)通过某溶液时，如果该溶液对可见光区各种波长的光都没有吸收，即入射光全部通过溶液，则该溶液呈无色透明状。当该溶液对可见光区各种波长的光全部吸收时．则该溶液显黑色。如某溶液对可见光区某种波长的光选择性的吸收，则该溶被即呈现出被吸收波长光的互补色光的颜色。例如当一束白光通过KMnO₄溶液时，该溶液选择性的吸收了绿色波长的光，而将其它的色光两两互补成白光而通过去，只剩下紫红色光，未被互补，所以KMnO₄溶液呈现紫色。

人们发现含有有色物质的溶液浓度改变时，溶液颜色的深浅度也就随着改变。溶液越浓颜色愈深，溶液越稀颜色愈浅。因此可以利用比较溶液颜色深浅的方法来确定溶液中有色物质的含量，这种方法就称为比色分析法。用眼睛观察比较溶液颜色深浅来确定物质含量的分析方法称为目视比色法。利用光电效应测量通过有色溶液后透过光的强度，求得被测物质含量的方法称为光电比色法。分光光度法是以棱镜或光栅为分光器，并用狭缝分出很窄的一条波长的光，并同样测量透过光的强度来求得被测物质的含量；由于光的波长范围窄，其测定的灵敏度，选择性和准确度都比比色法高。