摘要
氨基柱色谱柱使用方法
内容
氨基色谱柱使用方法：
1. 氨基柱既可以用于正相条件，又可以用于反相条件。
在正相与反相条件互换时需要注意两点：
1）色谱柱中无缓冲盐（建议使用乙腈/水＝10/90溶液除盐，1ml/min冲洗色谱柱60min）；
2）用异丙醇作为中间的过渡流动相（建议流速为0.5或0.8ml/min冲洗色谱柱90min）。
2. 正相条件下使用
1）我公司色谱柱内保存流动相为正己烷/异丙醇＝99.5/0.5，所以，新柱使用正相条件时，可以直接用流动相平衡色谱柱，然后检测。
2）不宜分析含醛基、羰基的化合物，不可用于还原糖的分析；流动相要脱气，并不得含有羰基化合物和过氧化物（质量不好的、含有少量羰基化合物和过氧化物）。
3）任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。
3. 反相条件下使用
1）如色谱柱内保存溶液为正相流动相，则先用异丙醇以0.5或0.8ml/min的流速冲洗60min，再用乙腈冲洗色谱柱30min，然后用流动相平衡色谱柱（如使用缓冲盐作流动相则先用过渡流动相平衡色谱柱，再换分析流动相）；
2）调节流动相的pH，使其pH范围在2.0～9.0，通常pH 3.0~7.0比较合适；
3）缓冲盐的正确使用：过渡流动相：有机相和水相的比例与分析流动相相同，但水相中不含缓冲盐。
4）分析酸性物质的注意事项：使用氨基柱进行酸性物质的分析时，酸性物质的存在意味着质子的存在，可 能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，导致使用一段时间后对于某些类的分析物保留性质有所改变或表现在柱效下降。建议：用5-10倍的柱体积的含0.5-1.0％NH3的乙腈-水(50:50)溶液冲洗该柱（冲洗后当然要再用不含碱的流动相洗去多余氨），之后再进行分析这类酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。
