本昂仪器公司检测葡萄酒中多菌灵和甲霜灵的分析方案

本昂仪器公司检测葡萄酒中多菌灵和甲霜灵的分析方案
1.样品前处理方法

称取10.0 g样品于50 mL烧杯中，加入20 mL水溶液，稀释混匀，待净化。
依次用3.0mL的正已烷 乙酸乙酯(1 1)，3.0mL去离子水活化HLB 小柱，待净化的样品6.0mL加至SPE净化柱，萃取过程需要在负压条件下进行，最后用6.0mL的去离子水洗涤提取容器，一并过柱，抽真空2 min，将小柱抽干；同时准备活化氨基－小柱，在LC- NH2氨基小柱中装入1/3高度的无水，用5 mL正已烷 乙酸乙酯(1 1)活化氨基－小柱，最后保持填料上剩余0.5 mL正已烷 乙酸乙酯(1 1)活化溶液；由上而下将HLB 小柱(上)NH2小柱(下)进行串联，用15 mL正已烷 乙酸乙酯(1 1)分三次对串联小柱进行洗脱，并且洗脱开始时需要负压抽真空，以便洗脱进行，收集全部洗脱液于15 mL玻璃刻度试管，置于40 ℃下氮吹干，用甲醇:水为5:95溶解残渣，定容至1.0 mL，取上层清液供LC/MS/MS分析。

2.LC-MS/MS仪器条件

(1) 液相色谱参数：
色谱柱： Phenomenex Synergi Fusion-RP 2.0X50mm，4um
流动相：A：水(含5mM 甲酸铵) B：甲醇(含5mM 甲酸铵)
柱温：30℃，流速：250μl/min；
流动相：A：水(5mM乙酸铵)，B：甲醇(5mM乙酸铵)；
梯度洗脱，洗脱条件见表1：
表1液相色谱条件
Time(min)Flow Rate (μL/min)A(%)B(%)
0250955

122501090
142501090

(2) 质谱条件参数：
离子源：Turbo V™ 离子源；
扫描模式：正离子
采集模式：多反应监测MRM

表2 多菌灵和甲霜灵的离子对及参数信息表
编号英文名中文名Q1Q3RT (min)
1Carbendazim多菌灵192.2160.1*
132.27.8
2Metalaxyl甲霜灵280.2220.2*
192.210.2
注：带*为定量离子对；

以上质谱参数适用于API TripleQuad 3200/4000/4500/5000/5500/6500以及QTRAP 3200/4000/4500/5500/6500型号仪器；