分光光度计是用不连续的波长采样反射物体或透射物体的一种测量仪器。由于不同物体分子的结构不同，对不同波长光线的吸收能力也不同，因此，每种物体都具有特定的吸收光谱。能从含有各种波长的混合光中，将每一种单色光分离出来，并测量其强度的仪器叫做分光光度计。
由于其光电接收装置为光电倍增管，它本身的特点是放大倍数大，因而可以用于检测微弱光电信号，而不能用来检测强光。否则容易产生信号漂移，灵敏度下降。针对其上述特点，在维修、使用此类仪器时应注意不让光电倍增管长时间暴露于光下，因此在预热时，应打开比色皿盖或使用挡光杆，避免长时间照射使其性能漂移而导致工作不稳。
分光光度法是比色法的发展。比色法只限于在可见光区，分光光度法则可以扩展到紫外光区和红外光区。分光光度法则要求近于真正单色光，其光谱带宽不超过3－5nm，在紫外区可到1nm以下，来自棱镜或光栅，具有较高的精度。
使用与维护
1、若大幅度改变测试波长，需稍等片刻，等灯热平衡后，重新校正“0”和“99%”点。然后再测量。
2、指针式仪器在未接通电源时，电表的指针必须位于零刻度上。若不是这种情况，需进行机械调零。
3、比色皿使用完毕后，请立即用蒸馏水冲洗干净，并用干净柔软的纱布将水迹擦去，以防止表面光洁度被破坏，影响比色皿的透光率。
4、操作人员不应轻易动灯泡及反光镜灯，以免影响光效率。
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源，通过系列分光装置，从而产生特定波长的光信号，使该光线入射样品。对于生物、化学分析，测试光源透过测试的样品后，部分光源被吸收，计算样品的吸光值，从而转化成样 品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比；对于光学薄膜分析，测试光源透过或被样品表面反射，根据对传感器接收到的信号进行分析，从而得到薄膜对某一段波长的透过率、反射率，通过其它算法，亦可得到镀膜的色彩、膜厚等数据。
