异柠檬酸裂解酶(ICL)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物种子在萌发过程中,通过乙醛酸循环及其他过程将脂肪转变成碳水化合物。ICL 是乙醛酸循环的关键酶之一。
测定原理:
ICL 催化异柠檬酸降解为乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和 NADH 在 LDH 的作用下生成乙醇和NAD,NADH 在 340nm 下有特征吸收峰,监测 340nm 吸光度的减小速率可间接反应 ICL 活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水
试剂组成和配制:
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;
试剂三:粉剂×3 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂仍-20℃保存;
试剂四:粉剂×3 瓶,-20℃保存;临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五:液体 800μL×2 支,4℃保存;临用前每支加入 560μL 蒸馏水,充分混匀待用;用不完的试剂仍 4℃保存;
试剂六:粉剂×3 瓶,4℃保存;临用前每瓶加入 5mL 蒸馏水,充分混匀待用。用不完的试剂-20℃保存;
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