乳酸含量(LA)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100T/48S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关,乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
测定原理:
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH 和H+,H+传递给PMS
生成的 PMSH2 还原 INT 生成红色物质,在 530nm 处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水浴锅。
样本处理:
1. 组织:按照质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.1g,加入 1mL
提取液)加入提取液,冰浴匀浆后于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。
2. 细胞:按照细胞数量(104 个):提取液体积(mL)为 500~1000:1 的比例(建议 500万细胞加入 1mL 提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率 300w,超声 3 秒,间隔 7 秒,总时间 3min);于 4℃,12000g 离心 10min,取上清测定。
3. 血清:直接测定。
3.提取物(或者)可配制成一定浓度,如5 mg/mL。
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