磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)测试盒
测定方法: 分光光度法
测定规格: 50管/48样
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意 : 正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
PEPC(EC 4.1.1.31)广泛存在于动物、植物、微生物和细胞中,是催化磷酸烯醇式丙酮-酸与二氧-化-碳-反应生成草酰乙酸呈不可逆反应的酶,对三羧酸循环的运转起重要作用。
测定原理:
PEPC催化磷酸烯醇式丙酮-酸和CO2生成草酰乙酸和HPO42-,苹果-酸脱氢酶进一步催化草酰乙酸和NADH生成苹-果-酸和NAD+,在340nm测定NADH减少速率,计算PEPC活性。
需自备的仪器和用品:
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液:60mL×1瓶,4℃保存;
试剂一:液体30 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂二:液体10 mL×1瓶, 4℃保存;
试剂三:粉剂×2支,-20℃保存,临用前加入4mL蒸馏水充分溶解待用;现配现用。
试剂四:粉剂×1支,-20℃保存,临用前加入5mL蒸馏水充分溶解待用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。
试剂五 :原液20μL×1支,4℃保存;
试剂五:稀释液10mL×1瓶,4℃保存;
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