-N-脱甲基酶(ERND)测试盒
测定方法: 微量法
测定规格: 100管/48S
保存条件: 低温避光保存
有 效 期: 6个月
注 意: 正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
细胞色素P450酶是一组主要存在于肝脏的酶系,在外源物质代谢中,尤其是和毒物的代谢,具有重要作用。ERND在P450酶系中相当于CYP2B亚型,与代谢的去甲基化密切相关。CYP2B具有催化底物形成非活性易于排泄的代谢产物而具有作用,也可使某些经CYP2B代谢活化。测定原理:
ERND催化释放甲醛,通过Nash比色测定甲醛含量,即可计算出ERND活性。自备仪器和用品:
普通离心机,超速离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水和冰。粗酶液提取:
1、除去细胞核,线粒体等大分子物质:称约0.5g组织,加入1mL试剂一,冰上充分研磨,10 000g 4℃离心30min,取上清液,转入超速离心管中。2、粗制微粒体:100 000g,4℃,离心60min,弃上清液。
3、除血红蛋白等杂质:向步骤2的沉淀中加1mL试剂一,盖紧后充分震荡溶解,100 000g离心30min,弃上清液。
4、终微粒体:向步骤3的沉淀中加试剂二0.5mL,充分震荡溶解,即粗酶液,待测。该待测液需当用。
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